Pogosto zastavljena vprašanja
Laboratorijska ultrafiltracija je postopek, ki uporablja polprepustne membrane za ločevanje makromolekul od mikroraztopljencev. Ko se uporablja transmembranski tlak, gredo mikroraztopljenci skozi membrano, medtem ko se makromolekule (večja molekulska masa) zadržijo. Tipične uporabe vključujejo koncentracijo, diafiltracijo (izmenjava pufra | razsoljevanje) in frakcioniranje. Ultrafiltracija je nežna metoda čiščenja brez denaturacije, ki je učinkovitejša in prilagodljivejša od alternativnih tehnik, kot je kromatografija.
Pri izbiri optimalne naprave za ultrafiltracijo je dobro izhodišče upoštevati velikost vaše ciljne molekule. Priporočamo, da izberete MWCO do največ 1/3 do 1/2 ciljne molekulske mase. Upoštevajte tudi zmogljivost naprave glede na začetno količino vzorca. Drugi dejavniki, ki jih je treba upoštevati, vključujejo, ali je potreben določen membranski material ali način delovanja – na primer, tlačna ultrafiltracija nudi povečano konsistenco transmembranskega tlaka, kar je morda bolj primerno za tarče, ki so nagnjene k agregaciji ali denaturaciji.
Celulozni triacetat (CTA) je idealen v aplikacijah, kjer je filtrat najpomembnejši.
Polietersulfon (PES) ima prednost zaradi nizkega umazanije in izjemnega pretoka v večini raztopin ter zlasti visokega izkoristka negativno nabitih ciljnih molekul.
Regenerirana celuloza (RC) je primerna za splošne vzorce in še posebej za oligonukleotide in peptide. Nazadnje, Sartoriusov patentirani Hydrosart ® (HY) – bolj kemično robustna različica RC – se običajno priporoča za najvišjo izkoristek vzorcev visoke vrednosti, kot je imunoglobulin G (IgG).
Laboratorijske ultrafiltracijske naprave se primarno uporabljajo z biološkimi vzorci, lahko pa se uporabljajo tudi za spremljanje okolja in industrijske aplikacije. V priročnikih z navodili nudimo izčrpne tabele združljivosti za vsak izdelek. Naprave Vivaspin® Turbo priporočamo zaradi najvišje kemične kompatibilnosti.
Z napravami za ultrafiltracijo Sartorius ni potrebe po dragih procesnih sistemih za ultrafiltracijo večjih volumnov vzorcev v laboratorijih za raziskave in razvoj. Vivaspin® 100 in Vivaflow® kasete omogočajo praktično obdelavo vzorcev v obsegu od 20 mL do 5 L z minimalnimi zahtevami opreme.
Integralna meja je najmanjša prostornina, na katero je mogoče koncentrirati vzorec. Za še večji nadzor je možno predhodno napolniti epruvete za filtrat naprav Vivaspin® 500 in Vivaspin® Turbo 4 in 15, da preprečite prekomerno koncentracijo ali se izognete potrebi po ponovnem redčenju vzorcev po ultrafiltraciji.
Optimiziranje vašega procesa, da bo ustrezal vsaki ciljni molekuli, mora biti prednostna naloga, saj enak material membrane in usmerjenost, MWCO in kombinacija naprave morda niso idealni za vsak vzorec. Začnite z izbiro MWCO do 1/3 ali 1/2 velikosti vašega cilja. Če je mogoče, preizkusite različne membranske materiale in vrste naprav. Preizkusite tudi metode predhodne obdelave, kot sta predhodno izpiranje ali pasivacija, in si oglejte Sartoriusove obsežne vodnike za uporabo in strokovno znanje, da boste našli pravo rešitev za vas.
To! Medtem ko je za to aplikacijo mogoče uporabiti vse naprave za ultrafiltracijo, naprave Vivacon ® - ki imajo vodoravne membrane Hydrosart ® - običajno dosegajo najvišje izkoristke iz vzorcev nukleinskih kislin. Na voljo so tudi možnosti PCR-grade za brezskrbno obdelavo v kritičnih aplikacijah, kot je forenzična priprava vzorcev.
Lahko! Sartorius ponuja priročno pretvorbeno tabelo za izbiro MWCO do 1/3 premera ciljnega virusa. Na primer, visoko izkoristek Lentivirusa - ki ima premer ~90 nm - je dosežen s 300 kDa MWCO Hydrosart ® ali 100 kDa MWCO PES membranami.
Običajno se bo učinkovitost ultrafiltracijskih membran z večkratno uporabo začela zmanjševati. Vendar Sartorius ponuja izbrane naprave - Vivaspin® 100 in Vivaflow® 50R | 200 – ki se lahko uporabi večkrat. Ti izdelki zahtevajo robustno čiščenje in ustrezne postopke shranjevanja, ki so opisani v navodilih za uporabo.
