Incucyte® Caspase-3/7 apoptozno barvilo
Barvila za apoptozo Incucyte® Caspase-3/7 so oblikovana za odkrivanje apoptoze (celične smrti) v živih celicah. Barve so bile prilagojene za kvantifikacijo celic v realnem času, ki so podvržene apoptozi, posredovani s kaspazo-3/7. Dodajanje barvil Incucyte® Caspase-3/7 Green, Red ali Metabolism Dyes zdravim celicam ne moti rasti in morfologije celic. Pri uporabi z monitorjem celic Incucyte® v realnem času in povezano programsko opremo ti reagenti zagotavljajo zanesljivo in natančno oceno celične smrti.
Barvila za apoptozo Incucyte® Caspase-3/7 vežejo aktivirani motiv za prepoznavanje kaspaze-3/7 (DEVD) na interkalacijsko DNA barvilo. Ko reagent dodamo v gojišče tkivne kulture, gre inertni, nefluorescentni substrat skozi celično membrano, kjer ga razcepi aktivirana kaspaza-3/7, kar povzroči sproščanje interkalacijskega barvila DNA in fluorescenčno obarvanje DNA v jedro. Z integrirano programsko opremo za analizo Incucyte® je mogoče kvantificirati fluorescenčne predmete in minimizirati fluorescenco v ozadju. Ti reagenti so bili potrjeni za uporabo z napravami Incucyte® in omogočajo oceno celične apoptoze v realnem času, ki jo povzročijo farmakološka sredstva in/ali genetski in okoljski dejavniki.
Shranjevanje in stabilnost barve
Barvila so na voljo kot raztopine v eni viali v dimetil sulfoksidu (DMSO). Vsaka viala zagotavlja zadosten volumen za izvedbo 100–200 testov (en test je ena vdolbinica mikrotitrske plošče s 96 vdolbinicami). Po prejemu je treba barvila Incucyte® Caspase-3/7 hraniti pri 4 °C do šest mesecev.
Priporočena uporaba
Priporočamo, da barvila Incucyte® Caspase-3/7 razredčite v celotnem gojišču kulture in jih dodate neposredno celicam v kulturi v skladu s spodnjimi smernicami:
- Incucyte® Caspase-3/7 Green: 1:1000 v gojišču kulture, za končno preskusno koncentracijo 5 μM
- Incucyte® Caspase-3/7 Red: Optimizirajte končno preskusno koncentracijo z redčenjem reagenta 1:200 v celotnem mediju, nato naredite 2-kratno serijo razredčitev za končne preskusne koncentracije 2,5, 1,25 in 0,5 µM
- Incucyte® Caspase-3/7 za presnovo: 1:1000 v gojišču za končno koncentracijo testa 1 μM.
Združljivo z analizatorji živih celic Incucyte® SX5, Incucyte® S3 in Incucyte® SX1.
