Incucyte® Cytotox NIR barvilo za štetje odmrlih celic

Barvila Incucyte® Cytotox so oblikovana za odkrivanje motenj celovitosti celične membrane v realnem času za kvantificiranje celične smrti. Ta barvila so idealna za kvantifikacijo celic, ki so izpostavljene citotoksičnosti, z uporabo metode mešanja in odčitavanja v realnem času. V kombinaciji z analizatorjem živih celic Incucyte® in integrirano programsko opremo ti reagenti omogočajo zanesljivo in natančno oceno citotoksičnosti. Ta barvila se lahko uporabljajo tudi v kombinaciji z drugimi reagenti Incucyte® za večkratno odčitavanje citotoksičnosti, proliferacije in apoptoze znotraj iste jamice. Dodajanje barvil Incucyte® Cytotox normalnim zdravim celicam ne moti rasti ali morfologije celic in daje malo ali nič intrinzičnega fluorescenčnega signala.

Ko postanejo celice nezdrave, se celovitost plazemske membrane zmanjša, kar barvilu Incucyte® Cytotox omogoči vstop in povzroči 100- do 1000-kratno povečanje fluorescence po vezavi na deoksiribonukleinsko kislino (DNA).

Shranjevanje in stabilnost

Barvila Incucyte® Cytotox so na voljo kot raztopina v dimetil sulfoksidu (DMSO), ki zagotavlja zadosten volumen za izvedbo 500–1000 testov (1 test = 1 vdolbinica mikrotitrske plošče s 96 vdolbinicami). Po prejemu raztopino hranite pri -20 °C ali 4 °C, odvisno od reagenta, in zaščiteno pred svetlobo. Če so raztopine pravilno shranjene, bodo stabilne 6 - 12 mesecev.

Priporočena uporaba

Priporočamo, da vsako vialo Incucyte® Cytotox Green ali Red Dye razredčite na osnovno koncentracijo 100 µM v popolnem mediju ali PBS. Nadalje ga lahko razredčimo v popolnem mediju za neposreden dodatek celicam, posejanim v ploščo s 96 vdolbinicami, da dobimo končno koncentracijo 250 nM (npr. 1:4000 razredčitev prvotnega zelenega ali rdečega barvila). Incucyte® Cytotox NIR Dye je treba razredčiti do končne koncentracije 0,6 µM (razredčenje 1:000) v celotnem volumnu medija. Pri uporabi v napravi Incucyte® priporočamo zbiranje podatkov vsake 2-3 ure.

Lastnosti

• zaznavanje citotoksičnosti v realnem času z nemotečimi reagenti
• zmanjšajte izgubo ranljivih celic s preprostimi protokoli mešanja in branja
• zbiranje zanesljivih podatkov z malo ali brez lastne fluorescence
• multipleks z meritvami proliferacije in apoptoze

Aplikacija

• idealen za odkrivanje motenj celovitosti celične membrane in kvantitativno določanje celične smrti v realnem času
• več aplikacij, kot so apoptoza, proliferacija in rast posameznih sferoidov, v kombinaciji z drugimi reagenti in metrikami Incucyte®