Priprema medija i pufera | Upstream

Portfelj Sartorius medija sveobuhvatna je kolekcija proizvoda koji podržavaju mnoge programe biološke obrade. 50 godina iskustva u kulturnim medijima potpomognuto 150 godina inovacija u farmaceutskoj industriji dovele su do dugoročnih odnosa s dobavljačima sirovina s dvostrukim izvorima, što jamči opskrbu i kvalitetu, kao i izvrsnu regulatornu potporu za sve vaše projekte.

Često postavljana pitanja

Primarna stanična linija proizvodi se iz jedne vrste stanica izolirane iz tkiva i uzgojene u optimalnim i kontroliranim uvjetima.

Sastojci staničnog medija uključuju hranjive tvari (organske i anorganske), vitamine, soli, plinovite faze O2 i CO2 , proteine ​​(iz definiranih ili nedefiniranih izvora), ugljikohidrate, citokine, faktore rasta i kofaktore.

Medij treba mijenjati svaka 2 do 3 dana. Međutim, medije je najbolje promijeniti kada gustoća stanica dosegne zdravu razinu, tako da to također ovisi o stopi rasta vaše stanične kulture. Većina medija također sadrži pH indikator koji mijenja boju u žutu kada pH padne, što je znak iscrpljenosti hranjivih tvari i nakupljanja otpada.

  1. Mediji koje sadrže serum - bazalni medij dopunjen nedefiniranim biološkim materijalima kao što su serum ili stanični ekstrakti;
  2. Serum-free medij koji sadrži životinjske komponente - bazalni medij nadopunjen definiranim proteinima, faktorima rasta i citokinima životinjskog podrijetla;
  3. Serum-free i xeno-free medij - bazalni medij nadopunjen definiranim proteinima, faktorima rasta i citokinima samo ljudskog porijekla;
  4. Kemijski definiran medij bez životinjskih komponenti - bazalni medij sastavljen od materijala iz kemijski definiranih izvora.

Medij stanične kulture osigurava hranjive tvari i čimbenike rasta potrebne za proliferaciju stanica. Tipični medij bazalne stanične kulture sastoji se od aminokiselina, ugljikohidrata, vitamina, anorganskih soli, glukoze, elemenata u tragovima i puferskog sustava za održavanje stabilnog pH. Tradicionalno, serum životinjskog podrijetla koristi se kao dodatak bazalnom mediju kako bi se osigurao izvor faktora rasta.

Serum-free medij je namijenjen uzgoju stanica u odsutnosti seruma životinjskog podrijetla. Serum-free mediji uključuju kemijski definirane medije koji ne sadrže životinjske sastojke ili hidrolizate.

Serum-free mediji omogućuju izvođenje stanične kulture pod definiranim skupom uvjeta, ograničavajući varijabilnost od serije do serije. Također, pojednostavljuje pročišćavanje i daljnju obradu.

Xeno, izvedeno iz grčke riječi "xenos", znači "stranac". Xeno-free je medij kulture s formulacijom koja sadrži samo komponente dobivene iz jednog organizma (npr. ljudskog), a ne bilo koje druge vrste poput goveda ili svinja.

Serum-free mediji ne sadrže bilo koji serum (od svih životinjskih vrsta), ali mogu sadržavati druge životinjske komponente (kao što su HSA i BSA), dok xeno-free mediji ne sadrže komponente neljudskih životinjskih vrsta, ali mogu uključivati ​​ljudski serum.

Svaki medij treba skladištiti u skladu s proizvedenim protokolima i preporukama. Tipični rok valjanosti je unutar 12-18 mjeseci od proizvodnje. Kada su otvoreni i dopunjeni drugim komponentama u sterilnim uvjetima, mediji se općenito mogu čuvati 1-4 tjedna, na 2-8°C i zaštićeni od svjetlosti. Klasične podloge dopunjene serumskim antibioticima mogu se držati na 4°C do 4 tjedna; serum-free mediji mogu se čuvati do 2 tjedna.

Neiskorištenom mediju treba dodati izbjeljivač u konačnoj koncentraciji od ≥10% za tretiranje svih prisutnih mikroorganizama prije odlaganja.