Često postavljana pitanja
Laboratorijska ultrafiltracija je proces koji koristi polupropusne membrane za odvajanje makromolekula od mikrootopljenih tvari. Kako se primjenjuje transmembranski tlak, mikrootopljene tvari prolaze kroz membranu dok se makromolekule (s većom molekularnom težinom) zadržavaju. Tipične primjene uključuju koncentraciju, dijafiltraciju (izmjena pufera | desalinizacija) i frakcioniranje. Ultrafiltracija je nježna metoda pročišćavanja bez denaturiranja, koja je učinkovitija i fleksibilnija od alternativnih tehnika poput kromatografije.
Prilikom odabira optimalnog uređaja za ultrafiltraciju, dobro je polazište uzeti u obzir veličinu vaše ciljne molekule. Preporučujemo odabir MWCO do maksimalno 1/3 do 1/2 ciljne molekularne težine. Također uzmite u obzir kapacitet uređaja, na temelju početnog volumena uzorka. Ostali čimbenici koje treba razmotriti uključuju je li potreban određeni materijal membrane ili način rada – na primjer, ultrafiltracija pod tlakom nudi povećanu konzistentnost transmembranskog tlaka, što može biti prikladnije za mete sklone agregaciji ili denaturaciji.
Celulozni triacetat (CTA) idealan je u primjenama gdje je filtrat od primarnog interesa.
Polietersulfon (PES) je poželjan zbog malog zaprljanja i izuzetnog protoka kod većine otopina i posebno visokog oporavka negativno nabijenih ciljnih molekula.
Regenerirana celuloza (RC) je prikladna za opće uzorke, a posebno za oligonukleotide i peptide. Konačno, Sartoriusov patentirani Hydrosart ® (HY) — kemijski robusnija verzija RC — obično se preporučuje za najveći oporavak vrlo vrijednih uzoraka kao što je imunoglobulin G (IgG).
Laboratorijski uređaji za ultrafiltraciju primarno se koriste s biološkim uzorcima, ali se također mogu koristiti za praćenje okoliša i industrijske primjene. Nudimo sveobuhvatne tablice kompatibilnosti za svaki proizvod u priručnicima s uputama. Za najveću kemijsku kompatibilnost preporučuju se uređaji Vivaspin ® Turbo.
Uz Sartorius uređaje za ultrafiltraciju, nema potrebe za skupim procesnim sustavima za ultrafiltraciju većih volumena uzoraka u R&D laboratorijima. Kazete Vivaspin® 100 i Vivaflow® omogućuju praktičnu obradu uzoraka u rasponu od 20 mL do 5 L uz minimalne zahtjeve za opremom.
Integralni graničnik minimalni je volumen na koji se uzorak može koncentrirati. Za još veću kontrolu, moguće je unaprijed napuniti epruvete za filtrat uređaja Vivaspin® 500 i Vivaspin® Turbo 4 i 15 kako bi se spriječila prekomjerna koncentracija ili izbjegla potreba za ponovnim razrjeđivanjem uzoraka nakon ultrafiltracije.
Optimiziranje vašeg procesa kako bi odgovarao svakoj ciljanoj molekuli trebao bi biti prioritet budući da isti materijal membrane i orijentacija, MWCO i kombinacija uređaja možda neće biti idealni za svaki uzorak. Započnite odabirom MWCO do 1/3 ili 1/2 veličine vašeg cilja. Testirajte različite membranske materijale i vrste uređaja gdje je to moguće. Isprobajte i metode predtretmana kao što je prethodno ispiranje ili pasivizacija i pogledajte Sartoriusove opsežne vodiče za primjenu i stručnost kako biste pronašli pravo rješenje za vas.
Da! Dok se svi uređaji za ultrafiltraciju mogu koristiti za ovu primjenu, Vivacon® uređaji - koji imaju horizontalne Hydrosart® membrane - obično postižu najveći oporavak iz uzoraka nukleinskih kiselina. Dostupne su i opcije PCR-grade za bezbrižnu obradu u kritičnim primjenama, kao što je priprema forenzičkih uzoraka.
Može! Sartorius nudi prikladnu tablicu pretvorbe za odabir MWCO do 1/3 promjera ciljanog virusa. Na primjer, visoko obnavljanje Lentivirusa - koji ima promjer od ~90 nm - postiže se s 300 kDa MWCO Hydrosart ® ili 100 kDa MWCO PES membranama.
Tipično, izvedba ultrafiltracijskih membrana počet će se smanjivati ponovljenom uporabom. Međutim, Sartorius nudi odabrane uređaje - Vivaspin® 100 i Vivaflow® 50R | 200 – koji se može koristiti više puta. Za ove proizvode potrebno je pridržavati se postupaka robusnog čišćenja i ispravnog skladištenja, koji su opisani u uputama za uporabu.
